Post by narutorevo on Aug 2, 2023 0:29:12 GMT -5
细胞中 10-15 分钟。用PBS洗涤细胞5分钟。随后，根昏暗的灯光下用 Cell-Light Apollo 567 染色试剂盒（RiboBio，C10310-1）对细胞进行染色，并用 Hoechst 33342 对细胞核进行染色。使用倒置荧光显微镜（LEICA，DM2500）获取代表性图像。 细胞活力 使用 Cell Counting Kit-8（CCK-8、Dojindo、CK17）通过符合制造商手册的方法测定细胞活力。在该测定中，通过
检测脱氢酶活性间接反映细胞活力，脱氢酶活性与活亚洲手机号码列表细胞计数呈正相关。用 siRNA 或质粒转染 乙酰氨基酚 12 h，或混合脂肪酸（0.25 mM 油酸 + 10 μg/mL 棕榈酸）在 5% CO 2中持续24小时和37°C。用含有100μM H 2 O 2的AML12培养基处理AML12细胞2小时。用含有500μM H 2 O 2的HM培养基处理PHH细胞2.5小时。诱导细胞损伤后，向细胞中添加含有10% CCK-8的培
养基。将培养皿保存在5%CO 2和37℃的培养箱中。在指定时间点（Synergy 4，Bio-Tek）在 96 孔培养板中测量 450 nm 处的吸光度值。 蛋白质印迹法 为了从小鼠肝脏中获得蛋白质，将肝脏在液氮中研磨，并向肝脏中添加补充有蛋白酶抑制剂（Roche）的RIPA裂解缓冲液（Sigma）以裂解组织，然后将其